Três fatores que afetam o efeito centrífugo da centrífuga

Primeiro, o tempo de centrifugação

O tempo de centrifugação é um fator muito importante que afeta o efeito centrífugo. O tempo de centrifugação necessário para diferentes métodos de centrifugação será diferente. Segue-se uma introdução detalhada de centrifugação diferencial e centrifugação em gradiente de densidade igual e centrifugação em gradiente de densidade. Para a centrifugação diferencial, o tempo de centrifugação refere-se ao tempo em que uma certa partícula se deposita completamente no fundo do tubo de centrífuga; para centrifugação em gradiente de densidade iso, o tempo de centrifugação refere-se ao tempo de equilíbrio no qual a partícula atinge completamente o ponto de iso-densidade; O tempo de centrifugao de uma centrifugao em gradiente de densidade refere-se ao tempo para formar uma zona bem definida. Para os dois últimos métodos de centrifugação, o tempo necessário de formação da zona ou o tempo de equilíbrio é complicado e pode ser determinado após o teste.

Em segundo lugar, a velocidade centrífuga

A velocidade de rotação da centrífuga é determinada principalmente pela velocidade de rotação do rotor e pelo raio de rotação das partículas. Ao descrever as condições centrífugas, é frequentemente expresso pelo campo de força centrífuga relativa. No trabalho real, os dados do campo de força centrífuga referem-se ao valor médio, ou seja, refere-se ao campo de força centrífuga das partículas no ponto da solução de centrifugação.

Em terceiro lugar, o pH e a temperatura do meio de centrifugação

O valor do pH do meio de centrifugação é geralmente estabelecido na faixa de pH em que a enzima é estável. Uma solução de buffer pode ser usada. No teste, a pesagem é realizada e o ambiente da própria centrífuga é corroído, evitando-se o ambiente de perácidos ou super-base.

Ao trabalhar com uma centrífuga, além de dar atenção especial à escolha do meio centrífugo, devemos também controlar a temperatura e o pH da solução do meio para evitar aglutinação, desnaturação e desativação das substâncias separadas. Controlaremos a temperatura de centrifugação para cerca de 4 ° C. Para algumas enzimas com boa estabilidade térmica, a centrifugação também pode ser realizada à temperatura ambiente.